快速提取南芥或水稻穗RNA
GT100南芥或水稻穗RNA快速提取步驟
來(lái)源:北京格瑞德曼儀器設(shè)備有限公司
種方法-濕磨法
1.取打碎機(jī)適配器于-80°C冷凍約15min,。
2.取一指節(jié)長(zhǎng)度的花序,,好帶上一片葉子,(材料量可多可少,,7d大小的苗上部分也能提出RNA),,放入國(guó)產(chǎn)2ml EP管中,加一粒鋼珠,,液氮速凍,。之后用鑷子取出,快速加入適配器中,。(好用國(guó)產(chǎn)的EP管即可,,進(jìn)口的管子液氮凍過(guò)后,容易裂)
3.打碎15s,,50HZ,。(水稻嫩葉為45S,60HZ,;老葉為,,70S 60HZ)
4.將材料再次放入液氮中。
5.用磁鐵吸出鋼珠,,加入1ml Trizol,,余下步驟即正常的RNA提取步驟,。
第二種方法-干磨法
1.取一指節(jié)長(zhǎng)度的花序(材料量可多可少,7d大小的苗上部分也能提出RNA),,放入國(guó)產(chǎn)2ml EP管中,,加一粒鋼珠,400ul Trizol,。(TRIZOL是一種新型總RNA抽提試劑,,可以直接從細(xì)胞或組織中提取總RNA。其含有苯酚,、異硫氰酸胍等物質(zhì),,能迅速破碎細(xì)胞并抑制細(xì)胞釋放出的核酸酶。)
2.打碎1min 50HZ (水稻嫩葉為45S,,60HZ ,;老葉為,70S 60HZ),。
3.吸出鋼珠,,補(bǔ)600ul Trizol。
4.余下步驟即正常的RNA提取步驟,。
注意:鋼珠遇到Trizol 會(huì)被溶解一部分,,所以之后的提取液是黃色的(有鐵離子)。
關(guān)于綠綿科技(Lumiere Tech. Ltd.)
北京綠綿科技有限公司(簡(jiǎn)稱:綠綿科技)以體現(xiàn)客戶服務(wù)高價(jià)值為宗旨,,以專業(yè)精神和技能為廣大實(shí)驗(yàn)室分析工作者提供樣品前處理,、樣品制備及分析、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析和管理的全面解決方案,,致力于協(xié)助客戶提高分析檢測(cè)的效率和水平,。
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