蜜桃传媒麻豆99成人|亚洲人妻中文字幕成人亚洲精品久久|色噜噜av学生中文精品深夜福利亚洲一区二区|亚洲午夜福利在线观看国产精品久久久久国产三级试频|老熟妇露脸嗷嗷叫91九色久久久精品.com|91精品国产高清久久久久久|精品日产乱码久久久久久仙踪林|日韩精品一区不卡|久久精品国产99国产精|国产91精品对白露脸全集观看,色噜噜噜噜噜噜噜噜,中文字幕国产2021,亚洲成人第四色

本應(yīng)用是ISOLUTE®  PLD+萃取血清中25-羥基維生素D,，然后在LC-MS/MS上分析檢測(cè)。

對(duì)于生化樣品制備來說,，ISOLUTE®PLD+除蛋白和磷脂板比傳統(tǒng)的蛋白沉淀技術(shù),，ISOLUTE®PLD+大幅改了提取清潔度。本應(yīng)用介紹了一種簡(jiǎn)單,、有效的®ISOLUTE PLD+萃取血清中25-羥基維生素D的方法,，萃取產(chǎn)物蛋白質(zhì)和磷脂含量極低，具有高重現(xiàn)性的回收率,。

分析目標(biāo)物
25-羥基維生素D2,、25-羥基維生素D3和內(nèi)標(biāo)d6-羥基維生素D3

樣品制備步驟
板子：ISOLUTE® PLD+除蛋白和磷脂板，貨號(hào)：918-0050-P01

樣品預(yù)處理
血清樣品加入10uL內(nèi)標(biāo)（相當(dāng)于30ng/m）,，混合,，靜止1小時(shí)左右發(fā)生結(jié)合反應(yīng)

使用的溶劑
ISOLUTE® PLD+ 板的每個(gè)孔加入400uL乙腈（MeCN）

使用的樣品
取100uL帶有內(nèi)標(biāo)的血清，混合,，重復(fù)抽吸/分配步驟,。

洗脫目標(biāo)物
正壓3psi或-2bar真空下約5分鐘，如果樣品含有高顆粒物可以適當(dāng)增加壓力或真空條件,。

萃取后處理
使用Biotage® SPE Dry (40 °C ,，40 L/min)或TurboVap® (40°C ，1.0 bar). 空氣或氮?dú)鈿饬鞔蹈奢腿∫骸?/p>

定容
用100uL30/70甲酸銨（2mM）100µl，0.1%甲酸水/甲醇定容,。

UPLC的條件
儀器
Waters Acquity UPLC

色譜柱
ACE EXCEL 2 C18-PFP, 100 mm x 2.1 mm id 2 μm, (ACT, UK)

質(zhì)譜的條件
Quattro Premier XE三重四極桿,，ESI電噴霧離子源

結(jié)果
色譜圖
三分鐘完成25-羥基維生素D2和D3分析，如下圖,。

回收率
使用血清和處理過的血清,，在不同濃度2-00ng/mL下測(cè)試，維生素D的高重現(xiàn)的回收率>70%,。如下圖,。

PBS/BSA校正曲線
使用PBS/BSA,，在不同濃度1-100ng/mL的校正曲線測(cè)定25-羥基維生素D2和D3,，具有非常好的相關(guān)系數(shù)，r² > 0.99,。

Chromsystems 校正曲線
使用已經(jīng)校正的血清標(biāo)準(zhǔn)（采購(gòu)自Chromsystems）,，在0-69ng/mL的濃度下，測(cè)定25-羥基維生素D2和D3,，具有非常好的相關(guān)系數(shù),，r² > 0.99。

DEQAS外部質(zhì)量評(píng)估方案
用優(yōu)化的方法得到DEQAS 25-羥基維生素D結(jié)果
本方法后經(jīng)5個(gè)DEQAS血清樣品萃取測(cè)試,，一起與Chromsystems校正因子進(jìn)行優(yōu)化,。DEQAS標(biāo)準(zhǔn)至少80%的結(jié)果落在所有實(shí)驗(yàn)室修剪平均的+或-25%以內(nèi)。

訂貨信息
貨號(hào)：918-0050-P01 ,，ISOLUTE® PLD+ 固定孔板 數(shù)量：1個(gè)

貨號(hào)：121-9600 Biotage® VacMaterTM-96 樣品處理歧管 數(shù)量：1個(gè)

貨號(hào)：PPM-96,，Biotage® PRESSURE+ 96 正壓歧管，數(shù)量：1個(gè)

貨號(hào)：SD-9600-DHS-EU,，Biotage® SPE Dry樣品濃縮系統(tǒng)220/240V 數(shù)量：1個(gè)

貨號(hào)：C103264,，TurboVap® 96樣品蒸發(fā)儀220/240V 數(shù)量：1個(gè)

附Biotage® Extrahera^TM方法設(shè)置，更多配置方法見原文

維生素D（vitamin D ）

為固醇類衍生物,，具抗佝僂病作用,，又稱抗佝僂病維生素。目前認(rèn)為維生素D也是一種類固醇激素,，維生素D家族成員中重要的成員是VD2（麥角鈣化醇）和VD3（膽鈣化醇),。維生素D均為不同的維生素D原經(jīng)紫外照射后的衍生物。植物不含維生素D,，但維生素D原在動(dòng),、植物體內(nèi)都存在。維生素D是一種脂溶性維生素,，有五種化合物,，對(duì)健康關(guān)系較密切的是維生素D2和維生素D3。它們有以下三點(diǎn)特性：它存在于部分天然食物中；人體皮下儲(chǔ)存有從膽固醇生成的7-脫氫膽固醇,，受紫外線的照射后,，可轉(zhuǎn)變?yōu)榫S生素D3。適當(dāng)?shù)娜展庠∽阋詽M足人體對(duì)維生素D的需要,。

從食物中得來的維生素d,，與脂肪一起吸收，吸收部位主要在空腸與回腸,。膽汁幫助其吸收,。脂肪吸收受干擾時(shí)，如慢性胰腺炎,、脂肪痢及膽道阻塞都會(huì)影響他的吸收,。吸收的維生素d與乳糜微粒相結(jié)合，由淋巴系統(tǒng)運(yùn)輸,，但也可與維生素d運(yùn)輸?shù)鞍祝?alpha;-球蛋白部分）相結(jié)合在血漿中運(yùn)輸,。有些與β-脂蛋白相結(jié)合，口服維生素d與乳糜微粒結(jié)合,，比從皮膚中來的與蛋白結(jié)合者易于分解,。當(dāng)維生素d運(yùn)到肝臟中，在微粒體中經(jīng)單氧酶系統(tǒng)作用,，將其25位羥基化形成25（oh）d(25-hydroxy vitamin d3),，肝外的其他組織也可吸取維生素d及25-（oh）d3，因此組織中維生素d及25（oh）d3及其總量比血漿中多,，如果靶組織需要,，可將其釋放出來，他們?cè)谥窘M織中多,，釋放速度慢,，當(dāng)體重減輕，脂肪減少時(shí),，他們也可釋放出來,。靜脈注射維生素d，較快的由血漿進(jìn)入到組織中,。血漿中25（oh）d3在注射后1～3天達(dá)到高峰,，其濃度可達(dá)到20～40ng·ml-1,高可達(dá)80 ng·ml-1。濃度與攝入量有一定的關(guān)系,，小于4 ng·ml-1,臨床上可發(fā)生佝僂病及骨質(zhì)軟化,。25（oh）d3在腎線粒體單氧酶作用下（酶系統(tǒng)包括細(xì)胞色素p450、鐵硫蛋白及黃素蛋白）,，經(jīng)羧基化,，轉(zhuǎn)變?yōu)?,，25-（OH）2-VD3(1,25-dihydroxy vitamin d),他是維生素d的生物作用形式，現(xiàn)將其作為激素,。

臨床意義
1．維生素D又稱抗佝僂病維生素,，是類固醇衍生物，屬脂溶性維生素,。維生素D主要包括維生素D2（又稱麥角鈣化醇）及維生素D3,。其生物學(xué)作用主要包括①促進(jìn)小腸鈣吸收；②促進(jìn)腎小管對(duì)鈣,、磷的重吸收,；③調(diào)節(jié)血鈣平衡；④對(duì)骨細(xì)胞呈現(xiàn)多種作用,；⑤調(diào)節(jié)基團(tuán)轉(zhuǎn)錄作用,。
2．維生素D缺乏主要表現(xiàn)為骨質(zhì)軟化癥（osteomalacia）、骨質(zhì)疏松癥（osteoporosis）及佝僂病等,。前者常見于成人和孕產(chǎn)婦,，后者多發(fā)生于兒童。①骨質(zhì)軟化癥：成人（特別是孕婦,、乳母）維生素D缺乏引起的骨質(zhì)軟化癥，其臨床表現(xiàn)為骨質(zhì)軟化,，腰腿部骨疼痛,、易變形等；②骨質(zhì)疏松癥：維生素D缺乏所致的骨質(zhì)疏松癥常見于老人,，由于其腎功能降低,，胃腸吸收欠佳，戶外活動(dòng)減少,，影響骨鈣化可發(fā)生自發(fā)性骨折,。此外，維生素D缺乏也可引起肌肉痙攣,、小腿抽搐等手足痙攣癥的癥狀,；③佝僂病：由于維生素D的缺乏,，骨骼不能正常鈣化,，使骨骼變軟，彎曲變形,，患兒表現(xiàn)為煩躁,、夜驚、多汗等,，嚴(yán)重缺鈣患兒可見肋骨與軟肋骨銜接處有珠狀突起,，下肢呈“O”形或“X”形,，胸骨外凸形成雞胸等，由于鈣磷代謝失調(diào),，患兒牙齒發(fā)育不良,，易發(fā)生齲齒。
3．維生素D過多常由于過量攝入維生素D引起,。其臨床表現(xiàn)為疲勞,、無力、食欲缺乏,、惡心,、嘔吐、腹瀉等,，嚴(yán)重者可有生長(zhǎng)發(fā)育遲緩,、高熱、脫水,、癲癇發(fā)作等,，可引起腎、腦,、肺,、胰腺等臟器有異位鈣化灶和腎結(jié)石。

關(guān)于綠綿科技
北京綠綿科技有限公司(簡(jiǎn)稱：綠綿科技)以體現(xiàn)客戶服務(wù)高價(jià)值為宗旨,，以專業(yè)精神和技能為廣大實(shí)驗(yàn)室分析工作者提供樣品前處理,、樣品制備及分析、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析和管理的全面解決方案,，致力于協(xié)助客戶提高分析檢測(cè)的效率和水平,。主要代理產(chǎn)品：LabOS實(shí)驗(yàn)室運(yùn)營(yíng)系統(tǒng)、Lumtech半制備/制備液相色譜,、MassWorks準(zhǔn)確質(zhì)量測(cè)定及分子式識(shí)別,、New Objective納噴離子源、GE生命科學(xué)設(shè)備,、凝膠凈化前處理,、在線固相萃取、濃縮儀,、氮吹儀,、電噴霧離子遷移譜、全柱成像毛細(xì)管等電聚焦電泳儀,、實(shí)驗(yàn)室氮?dú)鈿錃饪諝獍l(fā)生器,、Agilent中端氣相液相、生物耗材,、Buffer緩沖液,、固相萃取耗材,。
電話：010-82676061/2/3/4/5/6/7傳真：010-82676068 E-mail：[email protected]。